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口蹄疫诊断检疫新技术及试剂盒研制
日期:2009-06-02 

主要完成单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
主要完成人员:谢庆阁,刘在新,曹轶梅,包慧芳,卢曾军,郭建宏,刘湘涛,杨苏珍,李  冬,陈应理,常惠芸
起 止  时 间:1999年1月-2005年9月
获 奖  情 况:2008年甘肃省科技进步三等奖
内 容  提 要:
  检测感染抗体的是口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测ELISA试剂盒(FMDV NSP 3ABC-I-ELISA),包括牛、羊和猪的试剂盒。该试剂盒使用基因工程表达的纯化复性抗原,采用间接ELISA模式。其特异性不低于95%,对感染1-5个月的牛、羊、猪的敏感性为100%,特异性高于95%。与国外的Ceditest、Intervet和UBI同类制品相比,符合率与Ceditest为98.05%,比其余二者敏感性高。该试剂盒的技术内容已申获专利(专利号:ZL3160188.X)。检测病原分子的是口蹄疫病毒多重RT-PCR(FMDV Multi-RT-PCR)检测试剂盒。该试剂盒没有病原血清型之分,扩增的三个DNA片段在琼脂糖凝胶上可以明显的分开,容易判定结果。可查到0.07LD50的病毒量,最高可检测到0.002TCID50的病毒量。对反刍动物OP液、淋巴结和扁桃体等低微含量样品的检出率具有明显的优势,比单一引物RT-PCR和病毒分离方法敏感。不管是非免疫动物,还是免疫动物,都能从人工感染和同居感染牛的OP液中检测到病毒分子。
  根据经济效益评估每年科研投入的年利润率达到了40%,经济效益显著。该技术是OIE推荐的口蹄疫诊断检疫新技术,自主研发,提升了我国口蹄疫诊断检疫水平,消除国际贸易检疫壁垒;也是国家口蹄疫参考实验室的日常诊断技术。该试剂盒用于2003-2008年我国口蹄疫疫情监测,明确了数起口蹄疫的病原分子特性和畜群感染状况,对口蹄疫的防治起到了支撑作用;也是全国大多数省市兽医实验室和出入境检验检疫局常用的口蹄疫诊断试剂盒,在家畜调运检疫、口蹄疫感染状况监测等方面得到广泛应用。

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