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猪繁殖与呼吸综合征防制技术的研究与应用
日期:2007-10-22 

  主要完成单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
  主要完成人员:蔡雪辉、童光志、郭宝清、柴文君、刘永刚、周艳君、仇华吉、王洪峰、
         刘文兴、代广军、孙  刚
  起 止  时 间:1997年7月—200年7月
  获 奖  情 况:2006年黑龙江省科技进步一等奖
  内 容  提 要:
  猪繁殖与呼吸综合征防制技术来源于"九五"农业部引进国际先进农业科学技术(“948”项目编号:972080)的专题项目和中华农业科教基金的项目(合同编号97-01-05-02)。该项技术的研究内容包括以下4各方面:
  1、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒分离鉴定技术,包括PRRS病毒分离技术和PRRS分离毒株的鉴定技术,应用基因克隆和RT-PCR方法对分离毒株的鉴定分型技术,应用该技术在国内率先分离并鉴定了国内流行的PRRS病毒毒株为美洲型,命名为CH-1株,并应用该技术对国内流行毒株的抗原变异规律和抗原分布特点进行了研究。
  2、国内代表毒株单抗制备及其抗原性的研究,本研究在原核表达系统中分别对PRRSV各结构蛋白进行了表达;并制备了一系列分别针对PRRSV CH-1a株的各结构蛋白的单克隆抗体,利用这些单抗对PRRSV CH-1a株的抗原表位进行了系统研究,根据研究结果初步绘制了针对我国PRRSV CH-1a 株结构蛋白的单抗的抗原表位图谱,这为疫苗用种毒的筛选和诊断抗原的选择奠定了基础。
  3、猪繁殖与呼吸综合征诊断技术方法的建立,在对国内代表毒株分离鉴定和抗原特性研究的基础上,建立了以PRRS全病毒为诊断抗原的间接ELISA检测技术,免疫过氧化酶单层试验和间接荧光试验,以及检测PRRS-N蛋白抗体的间接ELISA检测技术;根据PRRSV-ORF7基因比较保守的特性,建立了针对PRRSV-ORF7基因的RT-PCR方法。上述方法成为研究该病在我国流行特点的主要工具之一。
  4、繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的研制与应用,猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗是以国内分离毒株CH-1株为疫苗种毒,经多次克隆和反复传代驯化,筛选出1株疫苗种毒,采用先进的PRRS病毒增殖技术,克服了体外增殖高滴度PRRS病毒难的瓶颈问题,研制成功了高效、安全的PRRS灭活疫苗。该苗对母猪的保护率为 93.3%;对仔猪保护率为 95.2%。 
  该项技术推广应用于除西藏之外的大陆所有的省、市、自治区,为600万头母猪和260万头仔猪提供了PRRS的防疫措施。总共获经济效益217298.91万元(2004年价),科研投资年均纯收益率41.5元/元。

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